原理是该物质(的官能团)在某一特定波长下有吸收,并且,该物质浓度和峰面积成正比。即:A样品/A对照=C样品/C对照C,为浓度,可以理解成C=质量(mg)*纯度(%)/稀释倍数(ml)所以在使用标准品进行含量标定的时候,标准品的纯度是已知的量,称取一定量标准品后进行定容稀释。进样分析后,峰面积可从图谱上读取(A样品)。样品也称取一定的质量,稀释后进样分析。然后读取峰面积(A对照)。
现在最新的液相色谱仪,一般没有灵敏度可调,因为最后进行数据处理的部分全是色谱工作站及有关软件,所以不存在调灵敏度的说法。正常的情况下,液相分析中的待测样品峰面积在几百mAu*s至几千mAu*s,尽量不要低于100mAu*s或高于10000mAu*s。
如果样品峰面积太小,而仪器的基线噪声太大,会对你的检测有一定的影响;而峰面积太大,说明你的样品浓度太高了,这是对你所用的色谱柱进行考验,而且这种情况下,所测出的峰的峰形会出现较大的拖尾等现象。本人在从事15年的液相分析过程中,凡涉及液相分析方法确定时,基本都将有关待测成份(主成份)的峰面积控制在300-3000mAu*s的范围内,杂质分析时,则将所测成份的峰面积控制5-50mAu*s的范围内。